Centrífuga de lavagem de células

Tipos de centrífugas de lavagem de células

Uma **centrífuga de lavagem de células** é projetada para lavar células, incluindo células em crioprotetor, soro, meio de cultura, DMSO ou tampão. As lavadoras de células podem conseguir isso com a ajuda de centrífugas que separam os líquidos sobrenadantes das células, deixando as células para trás. Além disso, essas lavadoras de células são projetadas para executar várias tarefas, como remover substâncias indesejáveis como sal, lavar células com tampão ou solução salina, ressuspender as células e descartar quaisquer líquidos restantes. Elas são usadas em bancos de sangue, biotecnologia, indústrias farmacêuticas, laboratórios de pesquisa e outras indústrias relacionadas.

As lavadoras de células podem existir em duas formas diferentes. Essas incluem a lavadora de células manual ou a lavadora de células automática. Também se pode encontrar o tipo de cuba ou o tipo de sangue total. A lavadora de células manual é projetada para executar a lavagem de células manualmente com a ajuda de centrífugas. Por outro lado, as lavadoras de células automáticas são totalmente automatizadas para lavar células com ou sem uma centrífuga. Elas são mais sofisticadas e eficientes do que as lavadoras de células manuais, que exigem considerável entrada manual e tempo. Embora ambos os tipos de lavadoras de células possam auxiliar na isolação de células específicas de uma amostra de sangue total ou qualquer outra amostra de células, apenas uma pode ser precisa, dependendo do uso desejado, finalidades e especificações do produto necessárias. Ao escolher entre as duas, pode-se considerar fatores como o nível de automação desejado, os requisitos de capacidade, as restrições de orçamento e a importância da reprodutibilidade e consistência nos procedimentos de lavagem de células para determinar qual é a mais adequada para as suas necessidades.

As centrífugas de lavagem de células também podem ser categorizadas com base em seu design e função. Algumas delas são a lavadora de células de contrapressão, centrífuga ou lavadora de batelada e lavadora de células de fluxo contínuo. A que é mais comumente usada é a centrífuga lavadora de células em batelada, que é projetada para lavar uma grande quantidade de células. Normalmente, ela consiste em uma centrífuga, bomba de aspiração, recipiente de resíduos, linha de vácuo, tubulação e filtro. Devido à sua grande capacidade, elas são usadas principalmente em bancos de sangue e outras áreas relacionadas para preparar componentes sanguíneos, como glóbulos vermelhos, plaquetas e plasma. No entanto, a centrífuga lavadora de células de fluxo contínuo é projetada para lavar e processar células continuamente à medida que elas passam pelo sistema. Embora ambas realizem as mesmas funções, esta última não é tão comumente usada quanto a primeira.

Especificações e manutenção da centrífuga de lavagem de células

Especificações

• Volume de cultura: As centrífugas de lavagem de células estão disponíveis em vários volumes de cultura. Alguns modelos podem lavar apenas 10 mililitros, enquanto outros podem lidar com até 50 litros de culturas celulares. Volumes maiores exigem sistemas mais complexos e maior experiência para garantir a lavagem bem-sucedida.
• Força da centrífuga: Diferentes tipos de células têm densidades de flutuação específicas. Portanto, é necessária uma força centrífuga apropriada para sedimentar as células no fundo do tubo de centrífuga. A força g ou força centrífuga necessária para lavar diferentes tipos de células varia de 50 a 800 g. Algumas centrífugas têm um controle de velocidade variável que pode ser definido para diferentes tipos de células.
• Recuperação de células: A eficiência de uma centrífuga de lavagem de células é geralmente expressa em porcentagem de recuperação de células. Dependendo do design, algumas lavadoras de células podem recuperar até 98% da cultura celular original, enquanto outras podem recuperar apenas 85% a 90%.
• Velocidade da lavadora: O número de células que podem ser lavadas em uma centrífuga de lavagem de células por hora é chamado de vazão. A vazão é determinada pela velocidade do processo de lavagem, capacidade da centrífuga e tempo de extração. Alguns modelos podem processar 3.500 células por hora, enquanto outros são capazes de lidar com 20.000 células em uma hora.
• Mecanismo de raspar células: Depois de lavar as células, é essencial remover resíduos celulares e detritos que permanecem na superfície da célula. O mecanismo de raspar células ajuda a raspar e remover detritos indesejados, acelerando o processo de limpeza e garantindo resultados ótimos.
• Tipos de células: As centrífugas de lavagem de células são projetadas para lavar vários tipos de células. Algumas são especificamente feitas para lavar células aderentes, enquanto outras são adequadas para células suspensas. Além disso, certos modelos são projetados para lavar células de mamíferos, bactérias ou leveduras exclusivamente. Os protocolos de lavagem diferem significativamente de um tipo de célula para outro. Portanto, é essencial usar a centrífuga apropriada projetada para um determinado tipo de célula.

Manutenção

A manutenção regular da centrífuga de lavagem de células garante desempenho ideal, prolonga a vida útil do equipamento e minimiza o tempo de inatividade.

• Limpeza diária: Uma tarefa de limpeza diária é atribuída a um operador para limpar tanto o interior quanto o exterior da lavadora. Preste atenção às áreas onde os resíduos ou detritos celulares tendem a se acumular. O operador é responsável por executar o ciclo de lavagem usando um programa de detergente automatizado para garantir a lavagem completa de todas as rodas, compartimentos e bandejas. Depois que o ciclo de limpeza estiver completo, o operador deve secar todas as partes da lavadora adequadamente.
• Semanal: Ao longo da semana, membros da equipe designados devem inspecionar as lavadoras. Eles precisam verificar conexões, grampos, vazamentos e bombas de dispensação para identificar quaisquer peças soltas ou danificadas. Quaisquer problemas encontrados durante a inspeção devem ser documentados e relatados para reparo ou substituição imediata. Todos os componentes da lavadora, incluindo conexões e grampos, devem ser completamente higienizados para evitar contaminação cruzada. Os membros da equipe devem garantir que sejam devidamente treinados e tenham o conhecimento necessário para executar essas tarefas de forma segura e eficaz.
• Mensal: Após realizar inspeções semanais e procedimentos de higienização, todo o sistema deve ser completamente limpo pela primeira vez. Essa limpeza abrangente ajuda a manter o desempenho ideal e os padrões de higiene. As peças sobressalentes necessárias para a lavadora devem ser substituídas mensalmente para garantir o funcionamento adequado e minimizar o risco de falhas.

Aplicações de centrífugas de lavagem de células

As aplicações da centrífuga de lavagem de células giram em torno das necessidades da indústria de saúde e algumas outras indústrias baseadas na ciência. Aqui estão algumas aplicações comuns desta máquina.

• Manuseio de sangue: Uma das aplicações mais comuns da centrífuga de lavagem de células é o manuseio de sangue. Principalmente, o dispositivo é usado para preparar componentes sanguíneos, como glóbulos vermelhos, glóbulos brancos, plaquetas, linfócitos, granulócitos, plasmas e resgates, para mencionar apenas alguns. O dispositivo realiza tais tarefas com a máxima precisão.
• Análise hematológica: As centrífugas de lavagem de células são bastante úteis quando se trata de análise hematológica. Elas podem lavar e processar amostras de células sanguíneas, incluindo glóbulos brancos e glóbulos vermelhos. Posteriormente, elas são tipicamente analisadas com o objetivo de diagnóstico e pesquisa de doenças.
• Testes de imunologia e sorologia: Testes de imunologia e sorologia sempre exigiram antígenos e anticorpos celulares precisos e precisamente lavados. Esses anticorpos e antígenos são purificados com o dispositivo para estudos de alergia, distúrbios autoimunes e doenças infecciosas.
• Análise de sedimento urinário: A centrífuga de lavagem de células pode ser usada para analisar sedimentos urinários quando combinada com um analisador de urina. Com esta máquina, os clínicos podem obter uma imagem mais clara da saúde do trato urinário do paciente, função renal e bem-estar geral.
• Processamento citológico: A etapa de lavagem é essencial no preparo de amostras de células para exame citológico. Isso se aplica a amostras obtidas por aspirações com agulha fina, escarro e outras fontes. Uma centrífuga pode lavar os espécimes celulares para concentrá-los e prepará-los para coloração e microscopia.
• Purificação de cultura celular: Algumas centrífugas de lavagem de células científicas e industriais têm a capacidade de purificar culturas celulares. Elas podem remover contaminantes, metabólitos indesejáveis e meio de cultura residual. Uma vez purificadas, as células podem ser usadas para produção biofarmacêutica e pesquisa fundamental.

Como escolher uma centrífuga de lavagem de células

Ao escolher uma lavadora de células para um laboratório, os compradores precisam considerar vários fatores. Esses incluem a capacidade da máquina, software, recursos de segurança, velocidade, controle de temperatura, design, construção, preço, fornecedor e muito mais.

A capacidade da lavadora centrífuga deve corresponder ao volume de células a serem processadas. Os compradores podem escolher o tamanho da lavadora em termos de cubas, garrafas e tubos. Eles também devem considerar o tempo de processamento e a eficiência da unidade. Uma lavadora de células com grande capacidade ajuda a economizar tempo.

Uma centrífuga de lavagem de células com uma interface intuitiva garante operação simples e boa produtividade. Essa lavadora também pode ter configurações programáveis, permitindo que o pessoal pré-defina protocolos específicos e tenha fluxos de trabalho automatizados.

As máquinas de lavagem de células possuem muitos recursos de segurança, como travas de porta e botões de parada de emergência. As travas de porta impedem que os usuários abram a centrífuga de lavagem enquanto ela está girando. O botão de perigo interrompe imediatamente a centrifugação em uma emergência.

A velocidade da centrífuga é um fator importante na hora de escolher uma lavadora, pois afeta a separação das células dos fluidos. A velocidade é medida em rotações por minuto (RPM). Um RPM mais alto pode separar mais eficazmente as células-alvo do meio de cultura ou solução tampão. Os compradores precisam lavar os tipos de células que processam para determinar o RPM ideal.

Algumas lavadoras de células possuem controle de temperatura e podem resfriar as células durante a lavagem. Esse recurso de resfriamento é essencial quando se trabalha com células delicadas que podem perecer ou se tornar inativas em temperaturas mais altas.

Uma centrífuga de lavagem de células com design de circuito fechado minimiza o risco de contaminação cruzada. Esse design fornece recipientes ou contêineres seguros para o processamento de amostras individuais. A qualidade da lavadora de células pode ser determinada pelos materiais de sua construção. O aço inoxidável é geralmente forte e durável.

Ao comprar uma centrífuga de lavagem de células, os compradores precisam comparar os preços oferecidos por diferentes vendedores. Eles também devem verificar se o fornecedor oferece serviços adicionais, como instalação e suporte pós-venda.

Q&A

P1: Como as células devem ser armazenadas antes de serem lavadas com uma centrífuga de lavagem de células?

R1: As células cultivadas devem ser armazenadas em uma suspensão densa para manter sua viabilidade. As culturas bacterianas devem ser vigorosamente agitadas antes de adicionar novas bactérias para obter uma solução homogênea.

P2: Qual é a concentração ideal de células ao usar uma centrífuga de lavagem de células?

R2: Isso depende do tipo de célula e da aplicação posterior. Geralmente, uma concentração entre 1x10^6 e 1x10^8 células/mL é recomendada para a maioria dos tipos de células.

P3: Quais etapas devem ser tomadas para garantir que a célula seja lavada ao usar uma centrífuga de lavagem de células?

R3: Para garantir que as células sejam lavadas adequadamente, siga estas etapas: Escolha um tampão apropriado que mantenha o pH da célula e evite a lise. Ajuste o pH e a osmolaridade das células antes da lavagem. Adicione um tampão à suspensão celular para remover proteínas ou anticorpos indesejáveis. Não dilua as células em excesso, pois pode ser difícil ressuspenderá-las mais tarde. Misture bem a suspensão para garantir uma distribuição uniforme das células. Use uma centrifugação suave para evitar danos às células.

P4: Uma centrífuga de lavagem de células pode ser usada para todos os tipos de células?

R4: Não, nem todas. A centrífuga de lavagem de células é adequada para a maioria dos tipos de células, incluindo células de mamíferos, bactérias, leveduras e insetos. No entanto, o procedimento de lavagem recomendado e o tampão podem variar dependendo do tipo de célula.

P5: Quantas vezes as células devem ser lavadas para obter resultados ótimos usando uma centrífuga de lavagem de células?

R5: Isso depende do tipo de célula e dos contaminantes residuais. Para imunoensaios, 2-3 lavagens geralmente são suficientes. As células bacterianas podem exigir 4-5 lavagens para remover toxinas ou anticorpos residuais.